羟苯磺酸钙对肌酐测定的干扰研究

大光

羟苯磺酸钙对肌酐测定的干扰研究
作者：李毅 郝陈浩 吴杰红 蒲晓允
作者单位：第三军医大学新桥医院检验科
来源：2014-06-12 第一次全国中西医结合检验医学学术会议暨中国中西医结合学会检验医学专业委员会成立大会论文汇编


    肌酐，是肌酸和磷酸肌酸代谢的终产物，它主要由肌肉中磷酸肌酸的非酶促反应生成。血液中肌酸酐的测定，可以知道肾功能是否有严重障碍，肌酸酐的值越高，肾脏的障碍越大。目前血清肌酐的监测在临床治疗方案的确立方面起着越来越重要的作用。羟苯磺酸钙是一血管保护药。主要用于糖尿病肾病、慢性肾功能不全、慢性动静脉功能不全等多个方面的治疗。近来已有文献资料报道称，酚磺乙胺可干扰血肌酐的检测结果，但对于羟苯磺酸钙是否对血清肌酐检测存在干扰效应，还有待进一步证明。本研究参照CLSI推荐的干扰试验方法，开展了羟苯磺酸钙对肌氨酸氧化酶法检测肌酐干扰的研究。实验结果表明，羟苯磺酸钙对肌氨酸氧化酶法测定肌酐存在二元线性的负干扰，且此干扰对小于200μmol/L浓度的血清肌酐的负干扰作用较大。

1  材料与方法

1.1 试剂

    羟苯磺酸钙胶囊由上海朝晖药业有限公司生产，主要成份为羟苯磺酸钙一水合物。规格型号为0.5g*20s。羟苯磺酸钙的药代动力学特性，因极性大吸收较慢，消除半衰期T1/2 4h，单剂量口服500mg时最高血药浓度约为13μg/ml(本试验中选择采用此血药浓度)。

    肌氨酸氧化酶法试剂(Beckman Coulter公司)

1.2 仪器 略

1.3 方法

1.3.1 收集新桥医院不同肌酐浓度的血清样本，并配制成不同梯度浓度的肌酐血清样品。

1.3.2 预试验  对检测仪器进行精密度评估和校准，并进行定期质控，观察检测方法的稳定性。按照CLSI推荐方法得出肌氨酸氧化酶法重复性检测的标准差，得出本次实验的重复次数为3次。

1.3.3 配对差异干扰试验  取3.8ml配制的高肌酐值的混合血清加入260μg/ml的羟苯磺酸钙贮存液0.2ml作为试验组(羟苯磺酸钙浓度为13μg/ml)，3.8ml高肌酐值血清加入0.2ml生理盐水作为对照组。分析羟苯磺酸钙对肌氨酸氧化酶法测定的干扰程度。

1.3.4 剂量效应试验  以上述配制的试验组及对照组按不同比例进行混合，分别配置成含羟苯磺酸钙浓度为0μg/ml、3.25μg/ml、6.5μg/ml、9.75μg/ml、13μg/ml肌酐高值血清标本，肌氨酸氧化酶法进行检测，得出不同浓度羟苯磺酸钙对其检测肌酐的影响。

1.3.5 羟苯磺酸钙对不同浓度肌酐的干扰效应  建立肌酐由低到高的浓度梯度，分别测定不同浓度羟苯磺酸钙(6.5μg/ml，13μg/ml)对各个浓度下的肌酐检测的干扰情况。

1.4 统计学处理 略

2  结果

2.1 配对差异干扰试验结果

    ……根据实验结果可知(表1)，肌氨酸氧化酶法对肌酐测定有负干扰。



2.2 剂量效应试验结果

    根据剂量效应试验的结果可知羟苯磺酸钙对肌氨酸氧化酶法检测肌酐确实存在干扰。根据剂量效应结果(表2)，得出羟苯磺酸钙干扰效应与其浓度的最优拟合曲线方程，如图1（略）。用计算机得出羟苯磺酸钙浓度与肌氨酸氧化酶法检测肌酐的干扰程度的关系曲线方程为：Y=-0.0379x^2-1.6597x+ 427.11，R^2=0.9977。



2.3 羟苯磺酸钙对不同浓度肌酐的干扰效应

    从羟苯磺酸钙对不同浓度肌酐的干扰效应的结果来看，不同羟苯磺酸钙浓度对肌酐的干扰效应呈现相似的趋势，即在肌酐低浓度区间干扰较大，随着肌酐浓度的升高，其干扰效应逐渐降低，最后保持在一个相对稳定的水平。以肌酐浓度为横坐标，相应的干扰效应所占的百分比为纵坐标绘制曲线，如图2和图3（略）。

3  讨论

    羟苯磺酸钙是一种微血管保护药。羟苯磺酸钙可以通过调节微血管壁的生理功能，减少阻力，降低血浆粘稠度和血小板的高聚集性，从而防止血栓形成。能提高红细胞柔韧性；能间接增加淋巴的引流而减轻水肿。此外，还可抑制血管活性物质(如组胺、5-羟色胺、缓激肽、透明质酸酶、前列腺素等)对微血管引起的高通透作用，改善基底膜胶原的生物合成。现本院多将其用于糖尿病眼病及肾移植术后的病人，且使用量相当可观。

    肌酐是肌酸和磷酸肌酸代谢的终产物，它主要由肌肉中磷酸肌酸的非酶促反应生成。肌酐是小分子物质，可以顺利通过肾小球滤过。血液中的肌酐经肾小球过滤后，大部分不被重吸收，而是直接由尿排出体外。因此，血清中的肌酐浓度和尿液肌酐的排泄量是肾小球滤过功能的有用指标。引起血清中的肌酐浓度变化的因素有怀孕、糖尿病、治疗药物、急性肾功能衰竭、慢性肾功能衰竭等，所以它作为肾功能的指标在多种疾病的诊断及病变过程的判定中具有重要意义。目前肌酐检测的主要方法为肌氨酸氧化酶法，应用时间较短。但具有操作简便、特异性强、线性范围宽、抗干扰能力强等优点，目前黄疸、溶血对肌氨酸氧化酶法的肌酐检测没有影响，药物干扰方面的报道较少。我们的试验结果显示，羟苯磺酸钙存在时，对酶法产生负干扰，其剂量效应曲线方程为：Y=-0.037x^2-1.6597x+427.1l，R^2=0.9977。从羟苯磺酸钙对不同浓度肌酐的干扰效应的结果来看，羟苯磺酸钙主要对低浓度的肌酐的检测引起较大的干扰效应，随着肌酐浓度的增大，其干扰效应趋于稳定。现新桥医院采用的肌酐正常范围标准为45～105μmol/ml，因而受羟苯磺酸钙的干扰较大，因此当服用羟苯磺酸钙的病人，尤其血肌酐水平在正常值上限或下限范围时，要特别注意羟苯磺酸钙对肌酐检测结果的干扰效应。

    总之，对于服用羟苯磺酸钙的患者进行肌酐检测时，一定要考虑到其干扰效应，根据剂量效应曲线计算出干扰效应的大小，从而可以得到相对准确的血肌酐值。

夕阳红

大光老师发表的这些文章我经常看一看，明白很多用药的知识、对我们肾移植患者帮助很大很大。谢谢您！

凤凰涅_vB1So

那到底是吃好还是不吃好啊。