基于血浆蛋白质组学建立肾移植临床几乎耐受者诊断模型

大光

　　诱导移植免疫耐受，是避免肾移植排斥反应、延长受者存活时间的有效途径，但目前尚缺乏理想的方法。目前应用的诊断方法存在有创、指标单一以及操作复杂、费用昂贵等问题。
　　蛋白质组学分析能够大规模获取生物样本中的蛋白质信息，有效避免单一指标的不足。华中科技大学同济医学院附属同济医院采用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱（SELDI-TOF-MS）技术，对肾移植受者血浆样本进行蛋白质组学分析，建立耐受诊断模型，研究结果显示，血浆中低分子量蛋白质与肾移植临床几乎耐受相关性较大，可作为筛选生物标记物的重要选择范围，早期识别临床几乎耐受者，从而有利于制定更有效的个体化免疫治疗方案。

　　一、本研究中“临床几乎耐受”的定义
　　临床实践中发现部分移植受者由于各种原因停用免疫抑制剂，但移植物功能却能长期维持稳定，这种现象被称为“临床操作性耐受”。而“几乎耐受”是指仅需少量免疫抑制剂便能维持不发生排斥反应。本研究中统一使用“临床几乎耐受”来表达上述两种概念。

　　二、研究对象
　　收集2011年11月～2012年11月来自华中科技大学同济医学院附属同济医院等多家医疗机构的43例受试者血浆样本。分为临床几乎耐受组（18例）、排斥反应组（12例）及健康对照组（13例）。
　　其中排斥组来自华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所（2011年11月～2012年9月）。临床几乎耐受组来自华中科技大学同济医学院附属同济医院、中国人民解放军总医院、西部战区总医院、西安交通大学第一附属医院、上海长征医院、山西省第二人民医院、中国人民解放军第四七四医院（2011年12月～2012年10月）。健康对照组来自华中科技大学同济医学院附属同济医院（2011年11月至2012年11月）。
　　纳入标准：
　　（1）耐受组：肾移植术后存活10年以上；全身状况良好，移植肾功能稳定；移植后少量应用免疫抑制药物，标准：泼尼松≤10mg/d；吗替麦考酚酯（MMF）≤1g/d；硫唑嘌呤≤1mg/kg/d；他克莫司血药浓度谷值≤5μg/L；环孢素A血药浓度谷值≤60μg/L。
　　（2）排斥组：所有受者均进行血尿常规、肝肾功能、血电解质、肾脏彩色超声多普勒、肾穿刺活组织病理检查。经移植肾穿刺活组织病理检查，按照Banff 2007移植肾病理分级标准，证实为急、慢性排斥反应以及慢性移植肾肾病。
　　（3）健康对照组：体检中心健康体检人群。
　　排除标准：近期活动性感染；合并恶性肿瘤；患有自身免疫性疾病；移植肾动脉狭窄，输尿管梗阻等肾疾病；其他重要脏器功能不全。

　　三、研究成果与讨论
　　通过筛选获得差异蛋白质谱峰21个，建立诊断模型。诊断模型是由6个节点（Node1～6）和7个终末节点（Terminal Node1）形成的树状图。每组内各节点蛋白质的平均峰强度按Node 1至Node 6顺序排列时，形成各组特征性的图形，这些指纹特征可用于区分及鉴别各组病例，也可以对几乎耐受进行诊断和预测。
　　该模型对耐受组、排斥组、健康组准确率分别为84.6%、83.3%、91.7%。耐受、排斥、及健康组的曲线下面积（ROC）分别为0.951、0.989及0.944。模型诊断临床几乎耐受及排斥反应均具有较高的敏感性和特异性，对于区分耐受组与排斥组正确率可达100%。
　　通过对模型节点质谱峰的生物学鉴定，获得质谱峰的蛋白质名称：B型利钠肽（ANFB，M2 565.15），黑色素浓集激素（MCH，M1 966.28），三叶因子1（TFF1，M6 674.78），强啡肽原（PDYN，M1 103.27），蛋白酶体激活亚3（PSME3，M1 716.69）。
　　B型利钠肽（ANFB）具有促进排钠、利尿等生理功能。已作为早期诊断移植肾急性排斥反应的敏感指标。黑色素浓集激素（MCH）是一种神经肽，主要存在于下丘脑侧外侧区，是调节能量代谢的关键调节因子，在免疫调节中也发挥重要作用。三叶因子1（TFF1）主要在胃肠杯状细胞中表达，具有黏膜保护、修复作用，与细胞迁移、增殖、分化密切相关。强啡肽原（PDYN）是强啡肽前体，而强啡肽在应激、免疫调控的机制中起着重要的作用。PSME3主要位于细胞核，参与免疫功能的调控。蛋白酶体激活亚3（PSME3）在耐受组血浆含量最高并与排斥组间差异明显，可作为识别几乎耐受者的良好指标进行进一步研究。上述节点蛋白质广泛参与免疫、炎症反应以及肿瘤发生等生物机制，但在肾移植领域的研究还非常有限，是进一步探索的良好靶点。这些血浆蛋白在临床中作为肾移植几乎耐受的预警及诊断指标也有重要应用价值。
　　研究者指出，本研究中排斥组受者存在不同程度的肾损伤，而几乎耐受者肾功能良好，筛选出的标记物中存在反应肾损伤及肾功不全的蛋白质，后续研究需要对节点蛋白的生物机制进行进一步探讨。由于几乎耐受者数量较少，本研究是小样本筛查，还需要扩大样本量进行前瞻性研究。

本文仅供学习参考，完整准确内容请查阅原始文献：徐洪来,周鸿敏,肖敏,杨超,高义,陈忠华.基于血浆蛋白质组学建立肾移植临床几乎耐受者诊断模型[J]. 中华器官移植杂志,2021,42(3):153-157. DOI：10.3760/cma.j.cn421203-20200404-00107.
原始地址：http://rs.yiigle.com/CN421203202103/1326899.htm

【链接】

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